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技術(shù)文章

賽默飛NanoDrop Ultra C紫外分光光度樣品與參比液弄反

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對于NanoDrop這類超微量分光光度計(jì),“樣品與參比液弄反"通常指在空白校正(Blank)步驟中,誤將樣品溶液當(dāng)作空白液進(jìn)行校正。這會導(dǎo)致后續(xù)所有測量數(shù)據(jù)的基準(zhǔn)錯誤,結(jié)果毫無意義。


一、錯誤的后果:數(shù)據(jù)不可用

空白校正的目的是建立一個“零"基準(zhǔn),以扣除溶劑和儀器本身的背景信號。如果用樣品液進(jìn)行空白校正:

1、樣品信號被錯誤扣除:儀器會將樣品本身的信號當(dāng)作“背景"扣除。這意味著后續(xù)測量同種樣品時,得到的將是一個被嚴(yán)重削弱甚至為負(fù)值的錯誤讀數(shù)。

2、所有數(shù)據(jù)失效:一旦用錯了空白液,后續(xù)測量的所有數(shù)據(jù)(濃度、純度比值等)都將失去任何參考價值,必須全部作廢。


二、解決方案:重新進(jìn)行正確的空白校正并測量

發(fā)現(xiàn)錯誤后,正確的做法就是拋棄錯誤數(shù)據(jù),重新測量。

1、清潔上下基座:使用無塵軟布(如Kimwipes),蘸取少量去離子水或70%乙醇,單向擦拭上下基座,并讓其干燥。

2、使用正確的空白液重新校正:

(1)在下基座滴加 1-2 μL 與樣品一致的空白液(如TE Buffer)。

(2)放下檢測臂,點(diǎn)擊軟件中的 “Blank" 按鈕。

(3)完成后,抬起檢測臂,用干凈的無塵布擦凈基座。

3、重新測量所有樣品:完成正確的空白校正后,再點(diǎn)樣測量你的所有樣品。


三、如何避免再次發(fā)生

1、養(yǎng)成良好習(xí)慣:操作前,務(wù)必在心理或?qū)嶒?yàn)記錄上明確區(qū)分“空白液"和“樣品液"。可以用不同顏色的離心管或標(biāo)記來區(qū)分。

2、善用自動功能:NanoDrop Ultra C具備“自動空白檢測 (Auto-Blank)"功能。開啟后,放下檢測臂儀器便會自動執(zhí)行空白校正,能有效避免人為錯誤。

3、注意溶劑一致性:確保空白溶液與樣品溶解液一致。每次更換緩沖液后,都必須用對應(yīng)的新空白液重新進(jìn)行空白校正。

4、利用內(nèi)置診斷:NanoDrop Ultra C的高分辨率攝像頭會自動拍攝液柱狀態(tài),Acclaro技術(shù)也能在樣品異常時發(fā)出預(yù)警,注意觀察這些提示。

TEL:18016231680

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